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WB實(shí)驗(yàn)代測(cè)中的顯影原理

更新時(shí)間:2017-06-08      瀏覽次數(shù):2024
   WB實(shí)驗(yàn)代測(cè)中的顯影原理
  WB實(shí)驗(yàn)代測(cè),客戶只需要提供樣本,其余所有試劑均由我司提供,下面我們就做WB實(shí)驗(yàn)代測(cè)的原理以及大致需要的試劑做了一個(gè)匯總。
  western免疫印跡是將蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移到膜上,然后利用抗體進(jìn)行檢測(cè)。對(duì)已知表達(dá)蛋白,可用相應(yīng)抗體作為一抗進(jìn)行檢測(cè),對(duì)新基因的表達(dá)產(chǎn)物,可通過(guò)融合部分的抗體檢測(cè)。
  與southern或northern雜交方法類似,但western免疫印跡采用的是聚丙烯酰胺凝膠電泳,被檢測(cè)物是蛋白質(zhì),“探針”是抗體,“顯色”用標(biāo)記的二抗。經(jīng)過(guò)page分離的蛋白質(zhì)樣品,轉(zhuǎn)移到固相載體上,固相載體以非共價(jià)鍵形式吸附蛋白質(zhì),且能保持電泳分離的多肽類型及其生物學(xué)活性不變。以固相載體上的蛋白質(zhì)或多肽作為抗原,與對(duì)應(yīng)的抗體起免疫反應(yīng),再與酶或同位素標(biāo)記的第二抗體起反應(yīng),經(jīng)過(guò)底物顯色或放射自顯影以檢測(cè)電泳分離的特異性目的基因表達(dá)的蛋白成分。該技術(shù)也廣泛應(yīng)用于檢測(cè)蛋白水平的表達(dá)。
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